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分子生物学实验-细菌颜色变变变

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      课程公告 Forum
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      课程目的与教学基本要求 Page
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      教学环节安排 Page
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      教学方法 Page
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      成绩评定方式 Page
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      课程教材 Page
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      主要参考书目录 Page
  • 第一章 原理学一学

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      第一节 什么是基因敲除,为什么要进行基因敲除 File
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      第二节 如何实现利用双交换同源重组法构建基因敲除突变体 File
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  • 第二章 引物设计

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      第一节 引物设计原则 File
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      第二节 设计引物用于构建基因敲除载体 File
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  • 第三章 基因敲除载体的构建

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      第一节 移液枪的使用 File
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      第二节 两条同源重组臂的PCR扩增与检测 File
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      第三节PCR产物的胶回收 File
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      第四节 利用Gibson Assembly法进行线性化质粒与同源重组臂的组装 File
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      第五节 Gibson Assembly产物的热击转化 File
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      第六节 挑取单菌落进行质粒的验证 File
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  • 第四章 “两步法”筛选基因敲除突变体

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      第一节 黄单胞菌的电击转化 File
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      第二节 第一次同源重组菌株的筛选 File
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      第三节 第二次同源重组菌株的筛选 File
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      第四节 PCR验证敲除突变体及表型观察 File
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