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• 第一章 原理学一学
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    第一节 什么是基因敲除，为什么要进行基因敲除 File

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    第二节 如何实现利用双交换同源重组法构建基因敲除突变体 File

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• 第二章 引物设计
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    第一节 引物设计原则 File

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    第二节 设计引物用于构建基因敲除载体 File

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• 第三章 基因敲除载体的构建
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    第一节 移液枪的使用 File

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    第二节 两条同源重组臂的PCR扩增与检测 File

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    第三节PCR产物的胶回收 File

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    第四节 利用Gibson Assembly法进行线性化质粒与同源重组臂的组装 File

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    第五节 Gibson Assembly产物的热击转化 File

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    第六节 挑取单菌落进行质粒的验证 File

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• 第四章 “两步法”筛选基因敲除突变体
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    第一节 黄单胞菌的电击转化 File

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    第二节 第一次同源重组菌株的筛选 File

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    第三节 第二次同源重组菌株的筛选 File

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    第四节 PCR验证敲除突变体及表型观察 File

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